Leica® BOND™ 免疫组织化学实验步骤：
重要事项：请参阅产品数据表首页或产品网页上的“应用”版块，以确定某件产品是否已经验证且获批在 Leica® BOND™ 上使用。如果是，请参阅产品特定实验步骤，了解具体说明。对于没有经验证的 Leica® BOND™ 实验步骤的产品，下面所列的条件可作为一个起点。
| 步骤 | 试剂 | 时间/温度 | |
|---|---|---|---|
| 1 | 脱蜡 | BOND™ Dewax Solution、100% 乙醇、BOND™ Wash Solution | 预编程的 Leica® BOND™ |
| 2 | 抗原修复 | BOND™ Epitope Retrieval ER2 Solution | 20 分钟，100˚C | 实验步骤：用 ER2 进行 HIER 20 分钟 |
| 3 | 过氧化物封闭液 | Refine Detection Kit Peroxide Block* | 5 分钟 |
| 洗涤 | BOND™ Wash Solution | 3x 0:00 分钟 | |
| 4 | 蛋白封闭液（可选） | #5425 NGS 或 #15019 Animal-Free Blocking Solution | 20 分钟 |
| 5 | 一抗 | 用 #8112 SignalStain® Antibody Diluent 稀释 | 30 分钟 |
| 洗涤 | BOND™ Wash Solution | 3x 2:00 分钟 | |
| 不适用 | Post Primary Mouse Linker | Refine Detection Kit Post Primary* | 不适用于兔抗体，小鼠抗体为 10 分钟 |
| 6 | 二次检测 | Refine Detection Kit Polymer* | 10 分钟 |
| 洗涤 | BOND™ Wash Solution/Deionized Water | 定制（参见下文） | |
| 7a | 可视化 | Refine Detection Kit Mixed DAB Refine* | 0:00 分钟 |
| 7b | 可视化 | Refine Detection Kit Mixed DAB Refine* | 10 分钟 |
| 洗涤 | 去离子水 | 3x 0:00 分钟 | |
| 8 | 复染 | Refine Detection Kit Hematoxylin* | 5 分钟 |
| 洗涤 | 去离子水 | 0:00 分钟 | |
| 洗涤 | BOND™ Wash Solution | 0:00 分钟 | |
| 洗涤 | 去离子水 | 0:00 分钟 | |
| 9 | 脱水（离线）： | ||
| 在 95% 乙醇中孵育切片 2 次，每次 10 秒。 | |||
| 在 100% 乙醇中重复孵育 2 次，每次 10 秒。 | |||
| 在二甲苯中重复孵育 2 次，每次 10 秒。 | |||
| 10 | 用盖玻片和 #14177 SignalStain® Mounting Medium 封片。 | ||
| 可选订制洗涤： | BOND™ Wash Solution | 2:00 | |
| BOND™ Wash Solution | 分配器类型：打开 0：00 | ||
| BOND™ Wash Solution | 2:00 | ||
| BOND™ Wash Solution | 分配器类型：打开 0：00 | ||
| BOND™ Wash Solution | 0:00 | ||
| 去离子水 | 0:00 | ||
*BOND™ Polymer Refine Detection Kit（货号：DS9800）中所含的试剂
LEICA® 是 Leica Microsystems IR GmbH 的注册商标。
BOND™ 是 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 的商标。Ltd. CST 和 Leica Microsystems IR GmbH 或 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 之间没有隐含的附属或赞助关系。
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