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SignalStar™ 空间验证抗体

SignalStar Multiplex IHC 技术使用特定的一抗和荧光检测试剂同时标记 FFPE 组织样品中的多种细胞蛋白质。它在空间生物学研究中可视化和分析组织样品内的蛋白质表达方面具有高准确性和可靠性。

CST 独立验证每个应用中的所有抗体，而 SignalStar mIHC 抗体经过专门验证，可与 SignalStar 技术结合使用。这意味着我们可以保证 SignalStar 抗体每次都能在您的检测中发挥预期的作用。

抗体验证过程

  • 在执行 SignalStar 验证之前，所有 SignalStar 抗体都必须通过严格的 IHC-P 验证流程。
  • 将 SignalStar 技术结果与传统 DAB 序列切片显色标记的结果直接进行比较，以确认特异性。
  • SignalStar 寡核苷酸偶联抗体在所有可用的荧光信道和成像轮次中针对多种多重检测板变化进行了优化。
  • SignalStar 测定法通过独特的重复实验、荧光成像仪器、天数以及自动化与手动实验步骤得到了验证。
  • 使用 SignalStar 寡核苷酸偶联抗体进行显色染色，用于确认在整个偶联过程中保持的抗原特异性。
  • 在已知表达目的生物标记物的阳性对照组织上检测抗体。
  • 考虑生物标记物的亚细胞定位和共定位。
  • 在相关癌症模型中，使用人类癌症组织阵列（这些阵列用于证明在广泛的组织类型中的抗体性能）评估 SignalStar 寡核苷酸偶联抗体的性能。
  • 彻底的批次测试可确保使用 CST® 空间验证抗体获得准确的 SignalStar 结果所需的可重复性。预先决定和指定稀释度和实验步骤。

显色比较

使用 CST<sup>®</sup> 空间验证抗体对石蜡包埋的人结直肠腺癌组织进行 SignalStar™ 多重免疫组织化学分析。

阳性细胞百分比/视野

 

4 重染色重复实验

DAB

Pan-Keratin

49.0%

54.0%

59.0%

PD-L1

19.3%

23.4%

25.6%

CD20

1.3%

1.5%

2.4%

CD8

8.7%

10.7%

8.1%

使用 Pan-Keratin (C11) & CO-0003-488 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #63566（绿色）、PD-L1 (E1L3N®) & CO-0005-594 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #28249（黄色）、CD20 (E7B7T) & CO-0011-647 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #36775（红色）和 CD8α (D8A8Y) & CO-0004-750 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #62750（青色）对石蜡包埋的人结直肠腺癌组织进行 SignalStar 多重免疫组织化学分析。包括单一和 4 重染色图像。如图所示，所有荧光团都被指定为伪彩。在 Leica Biosystems 的 BOND RX 自动染色机上进行染色。与显色性相比，在 SignalStar 检测 (n=2) 的序列切片的目标匹配区域中定量阳性细胞的百分比。

偶联物优化

对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌组织进行 SignalStar 免疫组织化学分析。

A) 使用 SIRPα (D6I3M) (SignalStar Conjugate 0034) 在 488（绿色）、594（黄色）、647（红色）和 750（青色）荧光通道中对石蜡包埋的人鳞状细胞肺癌组织进行 SignalStar 免疫组织化学分析。定量分析代表性 ROI 中的阳性细胞的百分比。B) 使用 Vimentin (D21H3) CO-0012-750 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #61002（上，青色）或 HER2/ErbB2 (D8F12) & CO-0019-488 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #98860（下，绿色）对石蜡包埋的人乳腺浸润性导管癌组织的序列切片进行 SignalStar 免疫组织化学分析，对第一次成像轮次（左图）与第二次成像轮次（右图）进行比较。如所示，所有荧光基团均已赋予伪彩。在Leica Biosystems 的 BOND RX 自动染色机上进行染色。

实验步骤验证

对石蜡包埋的人结直肠腺癌组织序列切片进行 SignalStar 免疫组织化学分析。

使用 Granzyme B (D6E9W) & CO-0009-647 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #37369（洋红色）或 Pan-Keratin (C11) & CO-0003-647 SignalStar™ Oligo-Antibody Pair #16373（红色）对石蜡包埋的人结直肠腺癌组织的序列切片进行 SignalStar 免疫组织化学分析，对手动实验步骤（左图）与自动 Bond RX 实验步骤（右图）染色进行了比较。如所示，所有荧光基团均已赋予伪彩。

技术支持

技术支持页面，用于搜索 SignalStar 相关的疑难问题解答信息和技术问题的答案。

Cell Signaling Technology、CST 和 SignalStar 是 Cell Signaling Technology, Inc. 的商标。所有其他商标均为其各自所有者的财产。访问 cellsignal.com/trademarks 以了解更多信息。

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