使用流式细胞术验证抗体
我们经流式细胞术验证的产品已在生物相关模型上进行了严格检测,可确保偶联和非偶联抗体的特异性和最佳信噪比 (S/N)。交叉平台验证可进一步确认抗体特异性。此外,对所有抗体检测了最佳稀释度、特异性、稳定性和批间可重复性,以确保它们自首次使用之后随时有效。
有了我们经流式细胞术彻底验证的抗体,便可检测细胞系、分离组织、抽吸物或血液样品中复杂的胞内信号转导级联,并信任您的结果的准确性。
验证包括:
- 使用阳性和阴性细胞系。
- 与同型对照比较信号,以估计一抗的非特异性结合
- 使用通路特异性抑制剂/激活剂处理
- 使用封闭肽、siRNA 和/或表达载体处理
- 进行磷酸酶处理来确认磷酸化特异性
- 进行广泛的质控检测,以保证过一段时间后的稳定性,并估计批间变化情况
- 优化实验步骤并确定最佳稀释度
- 在多种应用中验证,以确认抗体特异性
我们抗体的性能在多种平台上进行接受常规验证。下面的例子证实了为什么这样的检测是必要的。
在流式细胞术和免疫荧光法中进行的对比分析确认,CST 抗体可特异性检测靶标。虽然信号不是很稳定,但可正确定位至细胞的胞核区室。
A.
B.
流式细胞分析表明,与使用 Phospho-Stat5 (Tyr694) (D47E7) XP® Rabbit mAb #4322 所获得的低倍性诱导相比,竞争公司的 Phospho-Stat5 (Tyr694) antibody 所产生的信号更亮 (A)。但免疫荧光分析表明,竞争公司的抗体会有不适当的细胞浆和质膜染色,而 #4322 则仅显示相应的胞核染色 (B)。